一、基本信息 |
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细胞名称 |
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细胞品牌 |
江蓝纯生物 |
细胞规格 |
1×10⁶cells/T25培养瓶 |
细胞简介 |
该细胞来源于兔主动脉,常用作动脉粥样硬化的研究。 |
细胞英文 |
SMC细胞 |
种属来源 |
兔 |
组织来源 |
主动脉平滑肌 |
疾病特征 |
正常 |
支原体检测 |
阴性 |
细胞形态 |
多角 |
生长特性 |
贴壁生长 |
传代方法 |
1:2至1:6,每周2次 |
生长条件 |
气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37℃ |
培 养 基 |
MEM培养基,90% ;FBS,10% |
冻存条件 |
90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 |
发货方式 |
快递运输(特殊情况的另处理) |
供应范围 |
仅用于科研使用,不得用于其它用途 |
二、接受后处理 |
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处理1 |
收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们 |
处理2 |
请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h |
处理3 |
弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基 |
处理4 |
如果细胞密度达80%-90%请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司的完全培养基 |
处理5 |
接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系 |
三、细胞操作 |
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复苏细胞 |
将含有1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
细胞传代
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如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养: |
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 |
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2. 加 1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 |
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3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。 |
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4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
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细胞冻存 |
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类: |
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 |
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2. 4 min 1000rpm离心去掉上清。加1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10⁶/ml,每支冻存管冻存1ml 细胞悬液,注意冻存管做好标识。 |
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3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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注意事项 |
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。 |
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。 |
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3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 |
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4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细胞汇合度80%左右时正常传代。 |
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5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养,培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 |
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四、细胞备注 |
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备注1 |
建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于本公司技术部沟通交流。 |
备注2 |
如果细胞在运输中出现问题,可能个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 |
备注3 |
江蓝纯生物客户在细购买细胞过程中各种问题,可以随时拨打免费服务电话021-54720761,我们随时给予实验中的解答。 |
五、售后服务 |
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细胞予重发 |
1. 细胞运输中遭遇的各种问题,细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。 2. 收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。 3. 收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。 4. 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。 5. 常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发。 6. 细胞活性问题,请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。 |
细胞不重发 |
1. 客户操作造成细胞污染,不重发。 2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。 3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。 4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。 5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。 6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。 |