人肿瘤坏死因子配体超家族成员7(TNFSF7)ELISA试剂盒

产品仅供教研使用，用于定量检测细胞培养上清、血清、血浆中 人TNFSF7。

简介

肿瘤坏死因子配体超家族成员7（TNFSF7）是肿瘤坏死因子超家族（TNFSF）的一个成员，其编码的蛋白质在免疫系统中发挥重要作用，TNFSF7也被称为CD70，是一种由T、B和NK细胞及其前体直接表达的蛋白质，其主要功能是提供共刺激信号，促进T细胞的活化、分化和存活，从而产生功能性免疫应答，TNFSF7的配体是CD27L（TNFSF7，也称为CD70），这种配体仅在免疫细胞激活后组成型表达，当T细胞受体（TCR）识别抗原呈递细胞（APC）上的肽/MHC复合物时，CD80/CD86会被上调，并且新诱导表达CD70，这些配体分别触发CD4+和CD8+ T细胞上的CD28和CD27，从而引起细胞毒性T淋巴细胞的激活。

本试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术:将捕获抗体包被于酶标板上，捕获样品及标准品中的待测物TNFSF7，清洗后，再加入生物素标记的检测抗体进行孵育后清洗，形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”免疫复合物，随后加入链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶进行孵育，待孵育结束后清洗，接着加入TMB显色后，若样本中有待测物则显蓝色，加入终止液停止反应。检测过程中游离的成分均被洗去，用酶标仪在450 nm处测OD值，颜色的深浅和样品中的待测物的含量呈正比，通过绘制标准曲线计算出样本中TNFSF7的浓度。

8. 佩戴防护手套、防护服、眼睛和面部防护用品。处理后彻底洗手。

抗体工作液配置 : 使用前10分钟，将100×生物素化抗体于1000×g离心1分钟，随后用1×稀释液将100×生物素化抗体稀释成1×生物素化抗体工作液，根据所需用量当日配置当日使用。

酶结合物工作液配置 : 使用前10分钟，将100×SA-HRP溶液于1000×g离心1分钟，随后用1×稀释液将100×SA-HRP稀释成1×SA-HRP工作液，根据所需用量配置。

备 注：如待测样本中TNFSF7浓度高于标准品最高值，请根据实际情况选择适当的稀释倍数。

以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。

本图所示标准曲线仅供示例，结果计算应以同次试验标准品所绘标准曲线为准计算样本结果。

实验步骤

6. 终止反应：待显色反应结束后，每孔加入50μL终止液，轻轻混匀，5分钟内用预热完成的酶标仪在450nm处测吸光值。

回收率

回收率在不同基质的整个测定范围内选取在健康 人血清、血浆和细胞培养上清中加入3个不同浓度水平计算回收率。

线性关系
分别在选取的4份健康 人血清、血浆和细胞培养上清中加入高浓度TNFSF7，在标准曲线动力学范围内进行稀释，评估线性。

注意事项
本公司 人ELISA试剂盒检测范围、灵敏度等实验数据，因检测样本的不同会有所调整，实际数据以随货说明书为准。