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    人表皮角化细胞

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JLC-E0201 5×105cells 准现货 询价
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人表皮角化细胞
产品简介 :
产品名称 : 人表皮角化细胞
产品品牌 : 晶抗生物
组织来源 : 皮肤组织
产品规格 : 5×105cells/T 25细胞培养瓶


细胞简介 :

人表皮角化细胞分离自皮肤组织;表皮位于动物皮肤的外层,由胚胎时期外胚层形成,具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构,由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层,即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。表皮角化细胞(KC)是构成表皮的主要细胞成分,在体内处于不断增殖过程中,分裂的角化细胞主要位于其基底层,少数位于棘细胞层。随着向表层的推移,细胞的分化程度逐渐增加,并丧失分裂活性。


方法简介 :

晶抗生物实验室分离的人表皮角化细胞先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。


质量检测 :

晶抗生物实验室分离的人表皮角化细胞经PCNA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。


培养信息 :

包被条件 : 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培 养 基 : 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 : 每2-3天换液一次
生长特性 : 贴壁
细胞形态 : 上皮细胞样 
传代特性 : 可传1-2代
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培养条件 : 气相:空气,95% ;C O2,5%
人表皮角化细胞体外培养周期有限;建议使用晶抗生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。


细胞培养状态 :

发货时发送细胞电子版照片


使用方法 :

人表皮角化细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈上皮细胞样,在晶抗生物技术部标准操作流程下,细胞可传1-2代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。


客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作 :

1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。


注意事项 :

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和晶抗生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

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