鸡转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒

产品仅供教研使用，用于定量检测细胞培养上清、血清、血浆中 鸡TGF-β1。

简介
转化生长因子β1（TGF-β1），由 TGFB1 基因编码，它是转化生长因子β细胞因子超家族的多肽成员。它是一种分泌蛋白，具有多种细胞功能，包括控制细胞生长、细胞增殖、细胞分化和凋亡，它在控制免疫系统方面起着重要作用，在不同类型的细胞或处于不同发育阶段的细胞上显示出不同的活性，大多数免疫细胞（或白细胞）分泌TGF-β1。它可防止活化 T 细胞中的白细胞介素（IL）-1-和白细胞介素-2 依赖性增殖以及静止辅助 T 细胞和细胞毒性 T 细胞的激活，它可以抑制许多其他细胞因子的分泌和活性，包括干扰素γ，肿瘤坏死因子α和各种白细胞介素，它还可以降低细胞因子受体的表达水平，例如 IL-2 受体，以降低免疫细胞的活性，它也可以增加T 细胞中某些细胞因子的表达并促进其增殖。它对 B 细胞具有相似的作用，这些作用也根据细胞的分化状态而变化。它抑制增殖，刺激 B 细胞的凋亡，并控制抗体，转铁蛋白和MHCII 类蛋白在未成熟和成熟 B 细胞上的表达，它对巨噬细胞和单核细胞的影响主要是抑制性的；这种细胞因子可以抑制这些细胞的增殖，并阻止它们产生活性氧和氮中间体，与其他细胞类型一样，它也可以对骨髓来源的细胞产生相反的影响。

本试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术:将捕获抗体包被于酶标板上，捕获样品及标准品中的待测物TGF-β1，清洗后，再加入生物素标记的检测抗体进行孵育后清洗，形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”免疫复合物，随后加入链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶进行孵育，待孵育结束后清洗，接着加入TMB显色后，若样本中有待测物则显蓝色，加入终止液停止反应。检测过程中游离的成分均被洗去，用酶标仪在450 nm处测OD值，颜色的深浅和样品中的待测物的含量呈正比，通过绘制标准曲线计算出样本中TGF-β1的浓度。

8. 佩戴防护手套、防护服、眼睛和面部防护用品。处理后彻底洗手。

抗体工作液配置 : 使用前10分钟，将100×生物素化抗体于1000×g离心1分钟，随后用1×稀释液将100×生物素化抗体稀释成1×生物素化抗体工作液，根据所需用量当日配置当日使用。

酶结合物工作液配置 : 使用前10分钟，将100×SA-HRP溶液于1000×g离心1分钟，随后用1×稀释液将100×SA-HRP稀释成1×SA-HRP工作液，根据所需用量配置。

备 注：如待测样本中TGF-β1浓度高于标准品最高值，请根据实际情况选择适当的稀释倍数。

以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。

本图所示标准曲线仅供示例，结果计算应以同次试验标准品所绘标准曲线为准计算样本结果。

实验步骤

6. 终止反应：待显色反应结束后，每孔加入50μL终止液，轻轻混匀，5分钟内用预热完成的酶标仪在450nm处测吸光值。

回收率

回收率在不同基质的整个测定范围内选取在健康 鸡血清、血浆和细胞培养上清中加入3个不同浓度水平计算回收率。

线性关系
分别在选取的4份健康 鸡血清、血浆和细胞培养上清中加入高浓度TGF-β1，在标准曲线动力学范围内进行稀释，评估线性。

注意事项
本公司 鸡ELISA试剂盒检测范围、灵敏度等实验数据，因检测样本的不同会有所调整，实际数据以随货说明书为准。