• 293T-GFP/人胚肾细胞-绿色荧光蛋白标记
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    293T-GFP细胞

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JLC_K6920 1x10⁶cells/T25培养瓶 准现货 询价
  • 产品信息

一、基本信息

细胞名称

293T-GFP/人胚肾细胞-绿色荧光蛋白标记

细胞品牌

江蓝纯生物

细胞规格

1x10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管

种属来源

组织来源

细胞形态

上皮细胞样

细胞简介

Luciferase 293T细胞稳定表达绿色荧光蛋白标记。可用作绿色荧光蛋白标记活性检测中的阳性对照,也可用于活体动物成像实验。293细胞株插入SV40 T-抗原的温度敏感基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T。

puro药筛浓度

293T-GFP细胞puro药筛浓度为1. 0ug/ml,培养过程中可不用再添加puro,如若担心抗性随着传代时间降低,可定期用0.5ug/ml浓度puro维持

STR位

CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D21S11:28,30.2;D3S1358:15,16,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;Amelogenin:X;FGA:23;PentaD:9,10;PentaE:7,15;TH01:7,9.3;TPOX:11;VWA:16,19

细胞代数

10代以内

生物安全等级

1

生长特性

贴壁生长

生长条件

气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

保藏机构

ATCC; CRL-3216 DSMZ; ACC-635;中国典型培养物保藏中心细胞库

90% DMEM+10% FBS+PS

冻存条件

无血清冻存液,液氮储存

细胞货期

现货,1周左右

供应范围

仅用于科研使用,不得用于其它用途

二、细胞培养操作

25瓶

收货处理

观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态

传代密度

细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养

传代比例

首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿

传代方法

a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。

注意事项

1. 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。

2. 因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。

冻存管

收货处理

到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏

传代密度

第二天换液并检查细胞密度

传代比例

一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶

传代方法

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)第二天换液并检查细胞密度。

注意事项

1. 收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存。

2. 为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。

三、细胞冻存操作

冻存液配方

无血清冻存液,液氮储存

细胞密度

待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例

冻存方法

a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

注意事项

冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

四、售后服务

细胞予重发

1. 细胞运输中遭遇的各种问题,细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。

2. 收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。

3. 收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。

4. 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。

5. 常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发。

6. 细胞活性问题,请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。

细胞不重发

1. 客户操作造成细胞污染,不重发。

2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。

3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。

4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。

5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。

6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。

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