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    大鼠多巴胺神经元细胞

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大鼠多巴胺神经元细胞
产品简介 : 
产品名称 : 大鼠多巴胺神经元细胞
产品品牌 : 晶抗生物
组织来源 : 脑组织
产品规格 : 5×105cells/T 25细胞培养瓶


细胞简介 : 

大鼠多巴胺神经元细胞分离脑组织;多巴胺神经元,即:胺能神经元,主要指含多巴胺的神经元,其细胞体主要分布在黑质、脚间核和丘脑下部等处。在这些区域多巴胺含量很高。多巴胺在机体内合成时以酪氨酸为原料。

脑内的多巴胺主要是由黑质细胞来合成,这些多巴胺参与锥体外系统的活动,与躯体运动机能有密切关系。脑内多巴胺代谢失常时,可引起震颤性麻痹(帕金森震颤)。多巴胺(D opamine),是N A 的前体物质,是下丘脑和脑垂体腺中的一种关键神经递质,中枢神经系统中多巴胺的浓度受精神因素的影响,神经末梢的G nR H 和多巴胺间存在着轴突联系并相互作用,以及多巴胺有抑制G nR H 分泌的作用。

中脑的神经原物质多巴胺(D opamine),则直接影响人们的情绪。从理论上来看,增加这种物质,就能让人兴奋,但是它会令人上瘾。多巴胺在前脑和基底神经节(BasalG anglia)出现,基底神经节负责处理恐惧的情绪,但由于多巴胺的缘故,取代了恐惧的感觉,因此有很多人的上瘾行为,都是因多巴胺而起的。


方法简介 : 

晶抗生物实验室分离的大鼠多巴胺神经元细胞采用胰蛋白酶消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶 。


质量检测 : 

晶抗生物实验室分离的大鼠多巴胺神经元细胞经T H 免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。


培养信息 : 

包被条件 :  PLL(0.1m g/ml)
培 养 基 :  含B-27 Supplem ent、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :  每2-3天换液一次
生长特性 :  贴壁 细胞形态 神经元细胞样
传代特性 :  属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
传代比例 :  不传代
消 化 液 :  0.125% 胰蛋白酶
培养条件 :  气相:空气,95% ;C O2,5%
大鼠多巴胺神经元细胞体外培养周期有限;建议使用晶抗生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。


细胞培养状态 : 

发货时发送细胞电子版照片


使用方法 : 

大鼠多巴胺神经元细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈神经元细胞样,在晶抗生物技术部标准操作流程下,细胞属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。


客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作 : 

1.取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2.静置后,显微镜下观察细胞状态,拍照记录细胞的贴壁情况,漂浮的细胞需离心收集后在
离心管消化(脱落细胞处理方式),贴壁细胞也需消化后与脱落的细胞合并一起后重新接种。
3.神经元细胞消化
1)将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管,离心收集细胞(1200rpm5min),细胞沉淀按照下面脱落细胞处理方式处理该部分细胞。
2)培养瓶内贴壁细胞,用PBS(37℃预热)清洗细胞一次,将PBS收集到步骤1的离心管中,
不要直接丢弃。
3) 添加0.125% 胰蛋白酶消化液(0.25% 胰酶用PBS稀释一倍)1m L至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,放入4℃冰箱消化细胞3-5min(或者37℃温浴1min )。
4) 倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化(稀释法终止消
化,培养基用量不低于5ml)。
5)用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞,1200rpm 5min 离心去除残留胰酶;
6) 去掉上清,加入适量的完全培养基混匀(可补加1% FB S,促进贴壁),接种于孔板中(提前多聚赖氨酸包被孔板)。
7)待细胞贴壁后可用于后续相关实验。
4. 细胞收货脱落
1) 收集所有细胞悬液,1200rpm 5min离心,保留沉淀。
2) 添加0.125% 胰蛋白酶消化液(0.25% 胰酶用PBS稀释一倍)1m L至离心管中,轻柔重悬沉淀,放置4℃冰箱静置3-5min )。
3)消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化。
4)经1200rpm ,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(可补加1% FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内。
5) 接种后绝对静置24-48小时, 48小时后观察,否则细胞容易聚团。
5. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ (2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1m g/ml),明胶(0.1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。


注意事项 : 

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和晶抗生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

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